Гормональные методы диагностики беременности

В 1928 г. Ашгейм и Цондек предложили гормональный метод диагностики ранних сроков беременности, основанный на обнаружении в моче гормона передней доли гипофиза. Реакция Ашгейма и Цондека основана на следующем. Как было сказано выше, в организме беременных женщин был найден половой гормон, названный первоначально фолликулином. Кроме фолликулина, во время беременности был обнаружен другой гормон, сходный с гонадотропным гормоном передней доли гипофиза и названный Цондеком и Ашгеймом проланом. Пролан и фолликулин выделяются при беременности с мочой в больших количествах; но при этом количество фолликулина возрастает лишь к концу третьего месяца беременности, в то время как количество пролана весьма значительно уже в первые недели беременности. Фолликулин выделяется с мочой не только при беременности, но и при аменорее, в климактерическом периоде и при некоторых расстройствах менструального цикла. Поэтому определение беременности более удобно производить путем реакции на пролан, а не на фолликулин. Из двух выделенных в настоящее время проланов А и Б для диагностики беременности выгоднее пользоваться определением пролана Б (лютеинизирующий гормон), так как пролан А определяется в моче и вне беременности, например при опухолях половой сферы, во время климактерия, при эндокринопатиях.

Сущность реакции Цондек — Ашгейма заключается во введении инфантильным белым мышам мочи женщины и нахождении в половых органах животного характерных изменений, зависящих от действия пролана. Моча беременной, введенная мышам подкожно, вызывает, по Цондек — Ашгейму, три последовательные реакции в яичниках и матке животного.

Первая реакция: в яичнике находят созревающие фолликулы; в матке обнаруживается рост обоих рогов, которые становятся цианотичными и заполняются секретом. В мазках из влагалища обнаруживаются ороговевшие чешуйки и глыбки (стадия течки — эструс), или эпителий с ядрами (стадия предтечки — преэструс).

Вторая реакция: в яичниках обнаруживаются множественные кровоизлияния в полость фолликулов в виде «кровяных точек». В рогах матки изменений нет, в мазках из влагалища — слизь, лейкоциты и эпителий; это свидетельствует о стадии «покоя» матки — диэструс.

Третья реакция заключается в лютеинизации фолликулов, превращающихся в желтые тела. В рогах матки изменений нет. В мазках из влагалища — стадия «покоя»— диэструс.

Первая из вышеуказанных реакций не является специфичной для пролана, так как может быть вызвана и эстрогенным гормоном. Специфичными для пролана (хориального гонадотропина) являются вторая и третья реакции; наличие в яичнике хотя бы одного кровоизлияния или только одного желтого тела указывает на положительную реакцию на беременность.

   

Рисунок: Диагностика беременности по Цондеку-Ашгейму.

а – отрицательная реакция; б – положительная реакция.

   

Рисунок: Реакция Цондек-Ашгейма (под лупой):

1 – яичник; 2 – кровоизлияния и желтое тело; 3 – труба; 4 – рог матки.

Техника реакции Цондека - Ашгейма. Исследования проводят на пяти инфантильных мышах весом 6—8 г. По А. Н. Егорову, в северных широтах, где животные позже созревают, можно брать мышей весом 7—10 г. Вследствие значительной токсичности мочи, от чего гибнет около 15% животных, ее следует впрыскивать в разных количествах. Первая мышь получает подкожно 0,2 мл мочи, вторая 0,25, третья и четвертая по 0,3 и пятая — 0,4. Моча впрыскивается шесть раз в течение двух дней; результат устанавливается через 96—100 часов после первого впрыскивания. С третьего дня можно брать мазки из влагалища для определения эстрального цикла, но течка может быть обусловлена как гонадотропным гормоном, так и эстрогенным. При очень ранних сроках беременности может быть положительной только первая реакция, а вторая и третья выпадают позднее, поэтому не следует игнорировать значения первой реакции (Э. М. Каплун).

К недостаткам реакции Цондека — Ашгейма относятся: значительная продолжительность ее, необходимость иметь виварий, а также частая гибель мышей. Ввиду этих недостатков было предложено много модификаций: применение этой реакции на половозрелых мышах, а также на самцах, использование крыс и особенно кроликов в качестве тест-объекта.

Из этих модификаций значительным распространением пользуется реакция Фридмана на крольчихах, у которых, так же, как и у мышей, можно вызвать овуляцию и кровоизлияние в фолликулы после введения мочи беременных. Реакция выпадает очень ярко. Для этой реакции взрослой крольчихе, изолированной от самцов в течение 4—6 недель, три раза в день в течение двух суток вводят по 4 мл мочи в ушную вену. Н. С. Бабкина предложила вводить мочу не в вену, что вызывает интоксикацию, а подкожно. Через 48 часов животное вскрывают и осматривают половые органы. При положительной реакции матка увеличена и цианотична, яичники также увеличены, и на них ясно выступают темно-красные кровоизлияния.

 Рисунок: Реакция на беременность на крольчихе по Фридману. Видны кровоизлияния в яичниках.

К гормональным методам диагностики беременности относятся также меланофорные реакции (Консулов). Как тест-объект брали здоровых лягушек, у которых удаляли гипофиз. После введения мочи беременной у лягушек появлялось потемнение кожи. Реакция основана на наличии в секрете из гипофиза гормона, регулирующего отложение пигмента. Меланофорный гормон в большом количестве содержится в моче беременных. А. М. Дыхно упростил реакцию Консулова, предложив вместо трудной гипофизэктомии вводить лягушкам адреналин, отчего кожа их светлеет. А. Э. Мандельштам предложил модификацию меланофорной реакции на рыбках корюшках, помещаемых непосредственно в испытываемую мочу.

В последнее время были предложены новые биологические методы диагностики ранней беременности (Галли—Майнини, 1947), основанные на способности жаб и лягушек откладывать яйца или выделять сперматозоиды под влиянием гонадотропина мочи беременных.

Реакция Галли—Майнини была модифицирована И. Д. Шейнерманом. Р. А. Вартапетовым и Д. А. Новицким (1949) и др.

Техника модифицированной реакции следующая. В спинной лимфатический мешок двух лягушек (rana esculenta) вводится подкожно по 2,5 мл мочи беременной. Через час-два из клоаки лягушек стеклянной капиллярной пипеткой набирают 1—2 капли жидкости, накрывают покровным стеклышком и исследуют под микроскопом. Если в поле зрения находят подвижные или неподвижные сперматозоиды, то реакция положительна. В случае отсутствия сперматозоидов через час повторно берут жидкость из клоаки; если сперматозоидов не находят вторично, то реакция считается отрицательной. При отрицательной реакции лягушку уже на следующий день можно брать для повторного опыта. Предпочтительнее брать лягушек, а не жаб, так как сперматозоиды лягушек более широкие и их легче заметить. Там, где возможно, лучше пользоваться озерной лягушкой (rana ridibunda).

Эта реакция, испытанная нами и нашим сотрудником (С. Л. Гузинман) более, чем у 1000 женщин, показала ее высокую чувствительность (при малых сроках беременности); правильный результат (ответ можно получить уже через два часа) был найден в 98%.